產(chǎn)品展示
J774A.1 (小鼠單核巨噬細(xì)胞)
商品屬性
鑒定 | STR鑒定正確 | 種屬 | 小鼠 |
生長特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞樣 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 分類 | 小鼠細(xì)胞系 |
商品介紹
別稱 J-774A.1; J774.A1; J774 A1; J774A.1; J 774A.1; J774 A.1
種屬 小鼠
年齡(性別) 成年
組織來源 巨噬細(xì)胞
生長特性 貼壁細(xì)胞,
細(xì)胞形態(tài) 單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞樣
參考資料(來源文獻(xiàn))
J774A.1細(xì)胞來源于BABL/cN小鼠,有抗體依賴的吞噬作用,生長受硫酸葡聚糖、PPD和LPS的抑制;J774A.1細(xì)胞可產(chǎn)生IL-1β和大量的。 |
生物安全等級 1
生長培養(yǎng)基 DMEM+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~17小時
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
受體表達(dá)情況 Complement (C3), expressed;Fc receptor, IgG, high affinity I (Fcgr1), expressed
注意事項(xiàng) 1、該細(xì)胞不建議使用會刺激分化; 2、 超過3天不傳代細(xì)胞容易分化; 3、 培養(yǎng)時,存在少量分化細(xì)胞,屬于正?,F(xiàn)象。
細(xì)胞處理:
1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時,進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落,加入2倍量的中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
(9)細(xì)胞凍存
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠熱休克蛋白β2(HSPβ2)檢測試劑盒 ,英文名: HSPβ2 ELISA Kit
Mouse vascular endothelial cell growth factor receptor 2 (VEGFR-2) ELISA Kit 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR-2)檢測試劑盒
RatTissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISAKit 大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGSTs(HumanglathioneS-ansferases)ELISAKit人S轉(zhuǎn)移酶
細(xì)胞超氧化物陰離子比色法定量檢測試劑盒20次
Rattumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AILR3ELISAKit大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
PTN重組人 Pleiotrophin / PTN / HB-GAM 蛋白 Protein
Tanis/SELS (Selenoprotein S 0.5mgTanis/SELS (Selenoprotein S)又稱SELS 癥負(fù)調(diào)控因子蛋白(抗原)
SERPINI1重組人 SerpinI1 / Neuroserpin 蛋白 Protein
CLEC2B Protein Human 重組人 CLEC2B / CLECSF2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
TNFRSF10B Protein Human 重組人 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
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CLEC2B Protein Human 重組人 CLEC2B / CLECSF2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PTN重組人 Pleiotrophin / PTN / HB-GAM 蛋白 Protein
TNFRSF10B Protein Human 重組人 TRAIL R2 / CD262 / TNFRSF10B 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
SERPINI1重組人 SerpinI1 / Neuroserpin 蛋白 Protein
J774A.1 (小鼠單核巨噬細(xì)胞)小鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human helical peptide (Helical Peptide) ELISA Kit 人螺旋肽(Helical Peptide)檢測試劑盒
Humanhydroxylysine,HylELISAKit 人羥賴(Hyl)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
DuckImmunoglobulinE,IgE檢測試劑盒鴨免疫球蛋白E(IgE)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞組蛋白H3-K9甲基化熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
MousedipeptidylpeptldaseⅣ,DPPⅣELISAKit小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠生長激素釋放多肽(GHRP)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠生長激素(GH)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠損傷分子1(Kim-1)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
細(xì)胞接收后的處理:
1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運(yùn)輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。