SiHa (人子宮頸鱗癌細(xì)胞)

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)，不做其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)外的使用！

商品詳情：

別稱(chēng) Siha; SIHA

種屬 人類(lèi)

年齡（性別） 女性，55歲

組織來(lái)源 子宮頸鱗癌

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

背景描述：SiHa細(xì)胞是建自一個(gè)日本病人的外科手術(shù)的原位組織樣品。電鏡觀察表明，在SiHa細(xì)胞連接處有典型的橋粒，在SiHa細(xì)胞胞質(zhì)中有豐富的張力絲。在裸鼠中，SiHa細(xì)胞能形成低分化的表皮樣癌(Ⅲ級(jí))；SiHa細(xì)胞中，癌基因PRB和p53陽(yáng)性。

生物安全等級(jí) 2 [Cells contain human papilloma virus]

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 MEM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時(shí)間 ~50-60小時(shí)

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性 Yes, in nude mice; forms poorly differentiated epidermoid carcinoma (grade III).

基因表達(dá)情況 Oncogenes: p53+; pRB+

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。

將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min（視細(xì)胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；

a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng) ：

一、 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

二、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由 客戶(hù)自行承擔(dān)。

三、用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

四、貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

五、 請(qǐng)客戶(hù)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

六、 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪(fǎng)直至問(wèn)題解決。

七、該細(xì)胞僅供科研使用。

八、備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

九、 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： E2/UBCE ELISA Kit

Porcine Immunoglobulin E (IgE) ELISA Kit 豬免疫球蛋白E(IgE)檢測(cè)試劑盒

羊特定基因序列(Ovine)核酸檢測(cè)試劑盒 48T

CLIAKitforMacrobrachiumrosenbergiiNodavirus,MrNVELISAKit羅氏沼蝦諾達(dá)病毒

體液乙酰酯酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒20次

ELISAKitVTG鯉魚(yú)卵黃蛋白原

TP53重組食蟹猴 p53 / TP53 蛋白 Protein

MMP-9(matrix metalloproteinase 9 0.5mgMMP-9(matrix metalloproteinase 9) 基質(zhì)金屬蛋白酶-9抗原

PLA2G7重組人 PLA2G7 / PAFAH 蛋白 Protein

CD22 Protein Human 重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白 (aa 176-687, His 標(biāo)簽)

IL6 Protein Mouse 重組小鼠 IL6 / Interleukin-6 蛋白

MMP-9(matrix metalloproteinase 9 0.5mgMMP-9(matrix metalloproteinase 9) 基質(zhì)金屬蛋白酶-9抗原

CD22 Protein Human 重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白 (aa 176-687, His 標(biāo)簽)

TP53重組食蟹猴 p53 / TP53 蛋白 Protein

IL6 Protein Mouse 重組小鼠 IL6 / Interleukin-6 蛋白

PLA2G7重組人 PLA2G7 / PAFAH 蛋白 Protein

SiHa (人子宮頸鱗癌細(xì)胞)小鼠氧化型(GSSG)檢測(cè)試劑盒 96T/48T

Rat resistin (Resistin) ELISA Kit 大鼠抵抗素(Resistin)檢測(cè)試劑盒

Humanacidsphingomyelinase,ASMELISAKit 人酸性神經(jīng)鞘0脂酶(ASM)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor15-LO/LOXELISAKit大鼠15脂加氧酶

飲料尿素比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

MouseLaminin,LNELISAKit小鼠層連蛋白/板層素(LN)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠總   英文名稱(chēng)：   Mouse Total Cholesterol   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   TC

小鼠壞死因子   英文名稱(chēng)：   Mouse Total Tumor Necrosis Factor   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   TNF

小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體   英文名稱(chēng)：   Mouse ansferrin Receptor   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   TFR

小鼠轉(zhuǎn)移趨化生長(zhǎng)因子β   英文名稱(chēng)：   Mouse ansforming Growth Factor β   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   TGFβ