NCI-H1299(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗，不做其他科學(xué)實驗外的使用！

商品詳情：

別稱 H1299; H-1299; NCIH1299

種屬 人類

年齡（性別） 男性，43歲

組織來源 肺癌：非小細(xì)胞肺癌；轉(zhuǎn)移灶：淋巴結(jié)

生長特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

背景描述：NCI-H1299細(xì)胞來源于一個淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，患者接受了初期放療。NCI-H1299細(xì)胞均一性的部分缺失p53蛋白，并缺少p53蛋白表達(dá)。NCI-H1299細(xì)胞可以合成0.1pmol/毫克蛋白的NMB蛋白，而不合成促胃液釋放肽(GRP)。

生物安全等級 1

生長培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時間 ~30小時

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

基因表達(dá)情況 These cells stain positive for keratin and vimentin but are negative for neurofilament triplet protein. neuromedin B, The cells have a homozygous partial deletion of the p53 protein, and lack expression of p53 protein. The cells produce neuromedin B.

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。

將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min（視細(xì)胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；

a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞培養(yǎng)注意事項 ：

一、 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

二、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

三、用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

四、貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

五、 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

六、 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

七、該細(xì)胞僅供科研使用。

八、備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

九、 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠鉤端螺旋體IgG(Leptospira IgG)檢測試劑盒 ，英文名： Leptospira IgG ELISA Kit

Porcine ierleukin 10 (IL-10) ELISA Kit 豬白介素10(IL-10)檢測試劑盒

甲型副氏菌(SPA)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMIC-1humanELISAkit人巨噬細(xì)胞抑制因子-1檢測試劑盒

體液鎂離子(Mg)濃度化學(xué)比色法定量檢測試劑盒50次

ELISAKitSAA牛血清淀粉樣蛋白A

CSRP1重組小鼠 CSRP1 / CSRP / CRP1 蛋白 Protein

酶Ⅱ(CA2)天然蛋白 Native Carbonic Anhydrase II (CA2)

CFHR2重組人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 蛋白 Protein

CD160 Protein Human 重組人 CD160 蛋白

MDH1 Protein Rat 重組大鼠 MDHA / MDH1 蛋白

RAD23同源物B(RAD23B)重組蛋白 Recombinant RAD23 Homolog B (RAD23B)

CD160 Protein Human 重組人 CD160 蛋白

TNFRSF4重組小鼠 TNFRSF4 / OX40 / CD134 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CX3CL1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

GMFB重組人 GMFB 蛋白 Protein

NCI-H1299(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)小鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human leptin soluble receptor (sLR) ELISA Kit 人可溶性瘦素受體(sLR)檢測試劑盒

HumanComplemefragme3b,C3bELISAKit 人補(bǔ)體片斷3b(C3b)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor3-(Human3-Niotyrosine)ELISAKit人3-硝基酪

飲料(CO2)濃度酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次

MouselymphocytefactorELISAKit小鼠淋巴細(xì)胞因子檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

心脂肪酸結(jié)合蛋白   英文名稱：   hea fatty acid-binding protein   規(guī)格：      英文縮寫：   H-FABP

可溶性白細(xì)胞抗原G   英文名稱：   soluble leukocyte aigen G   規(guī)格：      英文縮寫：   sHLA-G

富組酸糖蛋白   英文名稱：   rich in histidine glycoprotein   規(guī)格：      英文縮寫：   HPRG

血液結(jié)合素   英文名稱：   Hemopexin   規(guī)格：      英文縮寫：   HPX