產(chǎn)品展示
ES-2 (人卵巢透明細胞癌細胞)
商品屬性
種屬 | 人 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
生長特性 | 貼壁 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 編號 | GOY-01X0079 |
商品介紹
別稱 ES2
種屬 人類
年齡(性別) 女性,47歲
組織來源 透明細胞癌,卵巢
生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
背景描述:ES-2細胞是建自45歲女性黑人的外科腫瘤標(biāo)本,該腫瘤為低分化卵巢透明細胞癌。ES-2細胞最初生長在軟瓊脂中;ES-2細胞在裸鼠中成瘤。ES-2細胞對多種化療藥物包括、卡氯芥、依托泊甙等表現(xiàn)出低到中等的耐受性;ES-2細胞表達低水平的P糖蛋白。
生物安全等級 1
生長培養(yǎng)基 McCoy’s 5A+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~28-36小時
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
致瘤性 Yes, tumors developed within 21 days at frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells.
基因表達情況 P glycoprotein
細胞處理:
1) 凍存細胞的復(fù)蘇:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當(dāng)延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。
細胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時,進行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落,加入2倍量的中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細胞,吹打細胞使其均勻分散。
(7)吸棄細胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
(9)細胞凍存
公司正在出售的產(chǎn)品:
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血小板衍化生長因子-BB 英文名稱: plateler-derived growth factor BB 規(guī)格: 英文縮寫: PDGF-BB
程序性死亡因子1 英文名稱: programmed death 1 規(guī)格: 英文縮寫: PD1
旁分泌的方式分泌血小板源性生長因子受體β 英文名稱: Platelet-derived growth factor receptor beta 規(guī)格: 英文縮寫: PDGF Rβ
細胞接收后的處理:
1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
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