產(chǎn)品展示
操作步驟:
X 光片 (8×0 英寸 )盒費(fèi)用切取含有目的DNA 片段的瓊脂糖凝膠條帶。
● 盡量切除不含有目的DNA 部分的凝膠,減少凝膠體積,提高DNA 回收率。
● 切膠時(shí),請(qǐng)使用長波長UV (360 nm )光盒。且不要將DNA 長時(shí)間暴露在紫外燈下,以防DNA 損傷。
2 稱取凝膠的重量近似地確定其體積。
● 凝膠重量的稱量方法:取.5 ml 離心管電子天平稱初質(zhì)量,切膠裝在離心管后稱終質(zhì)量,兩者差即為膠的質(zhì)量。不同離心管的重量可能有差異,因此,每個(gè)離心管的重量需單獨(dú)稱量。
3 按照每00 mg 瓊脂糖凝膠對(duì)應(yīng)00 µl 溶液BD 的比例,向離心管中加入溶液BD。
4 50 ℃水浴7-0min,直至凝膠*溶化。期間需要振蕩混合3 次。
● 瓊脂糖必須*融化,以免堵塞柱子,嚴(yán)重影響DNA 段的回收效率。
● 如果總體積大于500 µl,可適當(dāng)增加溶膠時(shí)間。
● 若此時(shí)溶液變紅,可加0 µl 3M NaAC (pH 5.2)。
5 將步驟4 所獲溶液置于DNA 純化柱中,靜置2min 。
● 膠塊*溶解后將膠溶液溫度降至室溫再上柱,因?yàn)榧兓谳^高溫度時(shí)結(jié)合DNA 的能力較弱。
6 2,000 rpm 離心min。若溶液量大于DNA 純化柱的容積,可分兩次離心,棄濾液。
● 此時(shí)DNA 被吸附于DNA 純化柱中的硅膠膜上。
7 加入500 µl 溶液BD。2,000 rpm, 離心min,棄濾液
8 加入500 µl 溶液PE。2,000 rpm, 離心min,棄濾液。
● 溶液PE 初次使用前用無水乙醇按: 4 稀釋,即含80% 乙醇。
● 此步驟的作用是將硅膠膜上吸附的蛋白、鹽等雜質(zhì)洗脫,以獲得高質(zhì)量DNA 段。
9 加入500 µl 溶液PE。2,000 rpm, 離心min,棄濾液。
0 2,000 rpm 離心 3min ,以*去除純化柱中的液體。
● 此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續(xù)酶促反應(yīng)。同時(shí)也利于DNA 段的充分溶解。
將離心柱置于新的.5 ml 離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-00 µl 溶液Eluent (60℃預(yù)熱),靜置2min 。2,000 rpm 離心min,管底即為目的DNA 段。貯存于-20℃。
● 溶液Eluent 可用無菌雙蒸水代替,但其pH 需為8.0-8.5,加入體積視DNA 目的段的多少、用戶對(duì)目的濃度要求而定。
● 對(duì)溶液Eluent 60℃預(yù)熱,會(huì)提高提取DNA 目的段的產(chǎn)量。
以下是X 光片 (8×0 英寸 )盒費(fèi)用的訂購信息!了解更多探針標(biāo)記及檢測產(chǎn)品點(diǎn)擊進(jìn)入。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
X 光片 (8×0 英寸 )盒費(fèi)用 | 盒 | 來電可享受優(yōu)惠 |
?
注意事項(xiàng):
X 光片 (8×0 英寸 )盒費(fèi)用● 溶液PE *次使用前請(qǐng)按瓶上標(biāo)簽加入4 倍體積的無水乙醇,即5 ml 溶液PE 中加入60 ml 無水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無水乙醇,使用后立即蓋緊蓋子。
● 本產(chǎn)品對(duì)電泳使用的Agarose 種類沒有嚴(yán)格限制,可以使用普通Agarose 。為了保證回收DNA 的質(zhì)量和DNA 回收效率,希望使用高純度的Agarose ,但沒有必要一定要使用低熔點(diǎn)的Agarose 等。
● 電泳時(shí)請(qǐng)使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液,以免影響電泳及回收效果。
● 請(qǐng)適當(dāng)延長電泳時(shí)間,在條帶分離清晰后進(jìn)行切膠回收,以免回收到多余雜帶。
● 為提高DNA 回收收率,切膠時(shí)應(yīng)盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強(qiáng)。但如果DNA 濃度小,或DNA 初始量少,回收率將會(huì)偏低。
● 溶液Eluent(0 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA 片段可直接用于各種酶促反應(yīng)等,不會(huì)影響后續(xù)試驗(yàn)。
● 為了保證回收效率,請(qǐng)不要使用未調(diào)整pH 值的超純水洗脫目的片段。
● 請(qǐng)嚴(yán)格按照操作步驟操作。
問:常用的DNA 濃度及純度檢測方法有哪些?
X 光片 (8×0 英寸 )盒費(fèi)用答:回收得到的DNA 片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過對(duì)比定量的Marker 來定量濃度;紫外分光檢測OD260/280 比值,OD260/280 比值在.7-.9 之間說明所得 DNA 純度較好,如果洗脫時(shí)不使用溶液Eluent而使用去離子水,比值會(huì)偏低,因?yàn)閜H 值和離子存在會(huì)影響光吸收值,但不表示純度低。
問:長片段回收時(shí)應(yīng)注意哪些問題?
答:X 光片 (8×0 英寸 )盒費(fèi)用當(dāng)DNA 片段長度較長(5 kb 以上)時(shí),回收效率會(huì)有所下降,這是DNA 切膠回收時(shí)的常見現(xiàn)象。此時(shí)建議按以下方法解決問題:
適當(dāng)增加待回收DNA 樣品的點(diǎn)樣量;
2 由于長片段DNA 不易從樹脂上洗脫下來,建議洗脫兩次,可以提高洗脫效率;
3 減少操作過程中對(duì)長片段DNA 的物理損傷,如混合振蕩操作不要過于劇烈,切膠時(shí)不要將DNA 長時(shí)間暴露在紫外等下。
奈福泮 CAS 23327-57-3 訂購|咨詢 規(guī)格: 00mg
,8-二羥基蒽醌 CAS 7-0-2 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
歐當(dāng)歸內(nèi)酯A CAS 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
8-去乙酰基滇烏堿;8-deacetyl CAS 00-77-3 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
酸黃連堿 CAS 3486-66-6 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
枸櫞酸 CAS 5949-29- 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
L-苯;L-Phenylalani CAS 63-9-2 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
阿奇 CAS 83905-0-5 訂購|咨詢 規(guī)格: 200mg
辛磷;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 CAS 486-8-3 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.g
雙去氧基姜黃素 : 24939-6-0 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
德爾塔林 : 80352 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
X 光片 (8×0 英寸 )盒費(fèi)用半乳糖激酶2(GALK2)elisa檢測試劑盒 英文名稱:GALK2 ELISA Kit, 英文縮寫:GALK2,
Biopyrrin蛋白(BPn)elisa檢測試劑盒 英文名稱:BPn ELISA Kit, 英文縮寫:BPn,
γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子(MIG/CXCL9)elisa檢測試劑盒 英文名稱:MIG/CXCL9 ELISA Kit, 英文縮寫:MIG/CXCL9,
細(xì)胞高密度脂蛋白(HDL-Cholesterol)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
血清樣品樹脂法去內(nèi)毒素試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
乳品乙醇比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
二肽基肽酶7(DPP7)elisa檢測試劑盒 英文名稱:DPP7 ELISA Kit, 英文縮寫:DPP7,
集落刺激因子(CSF)elisa檢測試劑盒 英文名稱:CSF ELISA Kit, 英文縮寫:CSF,
脫氧輔蛋白合酶(DHPS)elisa檢測試劑盒 英文名稱:DHPS ELISA Kit, 英文縮寫:DHPS,
腫瘤壞死因子超家族5(TLA/TNFSF5)elisa檢測試劑盒 英文名稱:TLA/TNFSF5 ELISA Kit, 英文縮寫:TLA/TNFSF5,
食品添加劑酪蛋白比色法定量檢測試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
微量 RNA 定量試劑盒mL哪里有賣 | 微量單鏈 DNA 定量試劑盒mL說明書 | 4 核酸液相雜交液0mL說明書 | 暗盒 (80 英寸 )個(gè)說明書 |
DNA 溶解液0mL多少錢 | DNA 稀釋液0mL哪里有賣 | X 光片 (57 英寸 )盒多少錢 | DNA 包被溶液00mL哪里有賣 |
暗盒 (57 英寸 )個(gè)費(fèi)用 | 定影粉袋多少錢 | ||