產(chǎn)品展示
注意事項:
. 接收到人心肌成纖維細胞提取物培養(yǎng),肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
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產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 價格 |
人心肌成纖維細胞提取物培養(yǎng) | Human Cardiac: Normal Cardiac Fibroblast Cell Derivatives | 來電可享受優(yōu)惠 |
人心肌成纖維細胞提取物【Human Cardiac: Normal Cardiac Fibroblast Cell Derivatives】
人心肌成纖維細胞提取物培養(yǎng)人心肌成纖維細胞提取物是從人原代心肌成纖維細胞提取的,人原代心肌成纖維細胞從正常人心肌組織制備。正常人心肌成組織采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準的方案進行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA*鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及0mg總RNA。68℃反應0min 后終止RT反應。利用x RT Buffer 運輸cDNA, μl cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人血管組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 潛在的應用: <>已知基因的PCR克??;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學;<6>芯片研究與表達圖譜。?
I-TAC / CXCL 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
c-MET / HGFR 抗體, 兔單抗 ELISA 50 µg
TXNDC7 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
FLRT 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
Prostatic Acid Phosphatase / ACPP 抗體, 兔單抗 ELISA 50 µg
SerpinA6 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
NAALADL 抗體, 鼠單抗 ELISA 50 µg
CES3 / Carboxylesterase 3 抗體, 兔單抗 IHC-P 50 µg
MSH6 / GTBP 抗體, 兔單抗 IHC-P 50 µg
TRAIL R4 / CD264 / TNFRSF0D 抗體, 兔單抗 ELISA 50 µg
人心肌成纖維細胞提取物培養(yǎng)5-喹啉分子式:45.6英文名稱:5-, the alcohol:578-67-6分子量: C9H7NO
環(huán)戊英文名稱:Loop e分子式:68.2分子量: C5H8:42-29-0
甲環(huán)戊英文名稱:Methyl group分子式:82.4分子量: C6H0:693-89-0
L-丙氨叔丁酯鹽鹽英文名稱:L- alanine tert butyl ester hydrochloride分子式:8.66分子量: C7H5NO2·HCl:3404-22-3
番瀉苷D英文名稱:The D分子式:848.77分子量:C42H40O9:3727-7-3
酒石酸氫鉀分子式:88.8英文名稱:Potassium hydrogen:868-4-4分子量: C4H5KO6
2,3-雙(4-硝)-5-四氮唑氯水合物分子式:424.8英文名稱:2,3- - (4- nitrophenyl) -5- phenyl tetrazole chloride hydrate:6923-3-6分子量: C9H3ClN6O4·xH2O
4-羥嘧分子式:96.09英文名稱:4- hydroxy:5953-7-4分子量: C4H4N2O
鹽酸分子式:68.5英文名稱:Hydrazine hydrochloride:2644-70-4分子量: ClH5N2
疊氮磷酸二酯(DPPA)分子式:275.2英文名稱:Two phenyl phosphate (DPPA):26386-88-9分子量: C2H0N3O3P; (C6H5
培養(yǎng)步驟:
人心肌成纖維細胞提取物培養(yǎng)對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按:2到:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
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