注意事項(xiàng)：
. 接收到人腎癌組織源細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。 

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人腎癌組織源細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒【Human Cancer PrimacellTM：Kidney Cancer Tissues Cells】
     人腎癌組織源細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書腎癌是發(fā)生于腎臟的癌病類疾病，又稱腎細(xì)胞癌，腎腺癌，起源于腎小管上皮細(xì)胞，可發(fā)生于腎實(shí)質(zhì)的任何部位，可分為普通型（透明細(xì)胞）腎癌、狀癌和嫌色細(xì)胞癌。腎癌的類型還包括集合管癌和腎癌未分類。腎癌細(xì)胞一般為上皮樣細(xì)胞，貼壁生長(zhǎng)，具有無限增殖能力，喪失接觸抑制現(xiàn)象，癌細(xì)胞間粘著性減弱。此外，易于被凝集素凝集，細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)發(fā)生紊亂。 雖然腎癌組織機(jī)械韌性很強(qiáng)，但利用本公司試劑盒中提供的腎癌組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的腎癌組織片能使得腎癌組織中腎癌組織源細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將腎癌組織源細(xì)胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)新生兒或成年人的腎癌組織源細(xì)胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的腎癌組織源原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。 人腎癌組織源細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)人的腎癌組織源組織細(xì)胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM人腎癌組織源細(xì)胞組織解離液 (3×ml) （2）人腎癌組織源細(xì)胞組織處理緩沖液 (00ml) （3）FibrOutTM人腎癌組織源細(xì)胞成纖維抑制劑(ml（500x）) （4）人腎癌組織源組織洗液 (5 x 00 ml) （5）人腎癌組織源細(xì)胞生長(zhǎng)因子（ml500x）及血清（5x0ml） （6）人腎癌組織源細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 (5 x 00ml) （7）人腎癌組織源組織預(yù)備液 ( x 00 ml) （8）人腎癌組織源細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書?

CD3e / CD3 epsilon 抗體 (APC), 鼠單抗 FCM    25 Test

S00A / S00C 抗體, 兔單抗 ELISA    50 µg

CD46 / MCAM 抗體, 鼠單抗 FCM    50 µg

CXCL / MGSA / NAP-3 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB    50 µg

ALPL 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 IHC-P    50 µg

CD50 / ICAM-3 抗體, 兔單抗 IHC-P    50 µg

TLR4 / TLR-4 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA    50 µL

SUMO2 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB   IF   IP  ICC/IF    50 µg

LDL Receptor / LDLR 抗體 (PE), 兔單抗 FCM    25 Test

Coagulation Factor VIII / FVIII / F8 (Light Chain) 抗體, 兔單抗 ELISA    50 µg

人腎癌組織源細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書偶氮胭脂紅G英文名稱：Azo rouge red G分子式：579.58分子量： C28H8N3NaO6S2：2564-8-3

環(huán)戊二三羰錳分子式：英文名稱：The three cyclopentadienyl manganese tricarbonyl：39分子量： C5H5Mn(CO)3

羊霍定A英文名稱：The Yin Yang Huo Ding A分子式：822.8分子量：C39H50O9：0623-72-8

4,4'-雙(9-咔唑)-2,2'-二甲聯(lián)分子式：52.64英文名稱：4,4'- (double 9- carbazole) -2,2'- two methyl Phenylbenzene：20260-0-7分子量： C38H28N2

雙-PCBM(異構(gòu)體混合物)英文名稱：Double PCBM (isomer mixture)分子式：0.4分子量： C84H28O4：048679-0-

布康唑分子式：4.78英文名稱：布康唑：64872-76-0分子量： C9H7Cl3N2S

三氯礬四氫呋絡(luò)合物分子式：229.4英文名稱：Three alum chloride tetrahydrofuran complex：9559-06-9分子量： C2H24Cl3O3V

五氟[雙(三氟乙酰氧)]分子式：59.99英文名稱：Five fluorine [bis (three fluorine acetyl) iodine] benzene：4353-88-9分子量： C0FIO4

2-三氟分子式：272.0英文名稱：2- three f：444-29-分子量： C7H4F3I

3-溴-5-氟三氟甲分子式：243英文名稱：3- -5- three f：30723-3-6分子量： C7H3BrF4

培養(yǎng)步驟：
人腎癌組織源細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。