產(chǎn)品展示
購(gòu)買(mǎi)小鼠蛋白激酶B(PKB)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格保證產(chǎn)品質(zhì)量,*,質(zhì)量可靠,靈敏度高,效果穩(wěn)定。等優(yōu)點(diǎn)已經(jīng)得到廣大客戶的認(rèn)可,您可放心,且我司有專門(mén)的售后部門(mén)對(duì)您進(jìn)行全線跟蹤。
產(chǎn)品名稱:小鼠蛋白激酶B(PKB)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格
英文名稱: PKB ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
存儲(chǔ)條件:2-8℃
有效期:6個(gè)月
特異性:本ELISA檢測(cè)試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。
檢測(cè)種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測(cè)試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床 。
小鼠蛋白激酶B(PKB)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格類型和操作步驟
ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標(biāo)記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測(cè)抗體、
(四)競(jìng)爭(zhēng)法。
小鼠蛋白激酶B(PKB)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格標(biāo)本要求
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可向客服索取說(shuō)明書(shū)》》 在線索取
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
小鼠蛋白激酶B(PKB)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時(shí),洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.倍,即為陽(yáng)性。
二、間接法(檢測(cè)未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過(guò)夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)
3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.倍,即為陽(yáng)性。
ONPG 干粉 g
液相內(nèi)毒素清除劑 00 次
RNase-free Tris HCl,M,pH 7.5 00mL
間充質(zhì)干細(xì)胞生長(zhǎng)因子 - 無(wú)血淸 5mL
20403-300 蝦堿性磷酸酶 300U
CAS8795-38-6 藍(lán)色葡聚糖 2000 g
23-0670-50 S-Methyl-ITU.sulfate(iN0S 抑制劑 ) 50mg
00884-2.5 IPTG 干粉 2.5g
D- 果糖 -6- 磷酸二 00mg
3- 苯甲酰丙酸 5g
PDTC(NF-κB 抑制劑 / 抗氧化劑 ) g
人重組 AP(c-Jun) 50fpu
人源脫嘌呤 / 脫嘧啶 (AP) 核酸內(nèi)切酶激酶 000U
動(dòng)物細(xì)胞裂解液 A 50mL
山羊抗小鼠 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標(biāo)記 000 μL 對(duì)三氟腈 分子式: 7.2 分子量: C8H4F3 英文名稱: Tothreef : 455-8-5
對(duì)三聯(lián) 分子式: 230.3 分子量: C8H4 英文名稱: Tothree : 92-94-4
對(duì)叔丁甲(PTBT) 分子式: 48.24 分子量: CH6 英文名稱: Paratertbutyltoluene(PTBT) : 98-5-
對(duì)叔丁甲酰 分子式: 92.26 分子量: CH6N2O 英文名稱: Tertbutylphenylhydrazine : 4300-38-5
對(duì)叔丁氯 分子式: 68.66 分子量: C0H3CL 英文名稱: Paratertbutylchloride : 3972-56-3
對(duì)四聯(lián) 分子式: 306.4 分子量: C24H8 英文名稱: P-quaterphenyl : 35-70-6
對(duì)位紅 英文名稱: ParaRed : 640/0/2 分子式: 293.28 分子量: C6HN3O3
對(duì)五聯(lián) 分子式: 382.5 分子量: C30H22 英文名稱: Tofive : 3073-05-0
對(duì)香豆 英文名稱: Forsweetbeanacid : 50-98-4 分子式: 64.5802 分子量: C9H8O3
小鼠蛋白激酶B(PKB)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格對(duì)香豆 英文名稱: Forsweetbeanacid : 50-98-4 分子式: 64.5802 分子量: C9H8O3
對(duì)硝碘 分子式: 249.0 分子量: C6H4INO2 英文名稱: Onm-nitroiodobenzene : 636-98-6
對(duì)硝磺酰 分子式: 22.62 分子量: C6H4ClNO4S 英文名稱: Nitrophenylsulfonylchloride : 98-74-8
對(duì)硝甲 英文名稱: Paranitrotoluene : 99-99-0 分子式: 37.4 分子量: C7H7NO2