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產品名稱:小鼠神經肽Y(NPY)酶聯免疫elisa試劑盒規(guī)格
英文名稱: NPY ELISA kit
規(guī)格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。
小鼠神經肽Y(NPY)酶聯免疫elisa試劑盒規(guī)格類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
小鼠神經肽Y(NPY)酶聯免疫elisa試劑盒規(guī)格標本要求
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后5分鐘以內進行。
小鼠神經肽Y(NPY)酶聯免疫elisa試劑盒規(guī)格技術流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
PKM 重組人 PKM2 / OIP3 蛋白 (His 標簽) PKM
CCL7 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 標簽) CCL7
FAM45A 重組人 CAMK / CaMKI-alpha 蛋白 FAM45A
CNTF 重組人 CNTF 蛋白 (His 標簽) CNTF
CQBP 重組人 HABP / CQBP / GCQBP 蛋白 (His 標簽) CQBP
IL4 重組人 IL4 / Interleukin-4 蛋白 IL4
COL2A 重組人 COL2A 蛋白 (aa 242-487, His 標簽) COL2A
LYPD3 重組人 C4.4A / LYPD3 蛋白 (His 標簽) LYPD3
PLTP 重組人 PLTP 蛋白 (His 標簽) PLTP
SEMA4A 重組人 Semaphorin 4A / SEMA4A / Semaphorin B 蛋白 (His 標簽) SEMA4A
MGAT5 重組人 MGAT5 / GGNT5 蛋白 (His 標簽) MGAT5
CA4 重組人 Carbonic Anhydrase IV / CA4 蛋白 (His 標簽) CA4
DPP0 重組人 DPP0 / DPRP3 蛋白 (His 標簽) DPP0頭 DNA(BamH I(Bgl II)-Sma I) 5nmol
丙烯葡聚糖凝膠 S-500 HR 50mL
96 孔板病毒 RNAout( 真空法 ) 次
CAS384-3-2 L- 鳥氨 0g
3043-50 肝素瓊脂糖 50mL
植物總蛋白質微量提取試劑盒 (SDS-PAGE) 30 次
L- 轉鐵蛋白 0mg
小鼠神經肽Y(NPY)酶聯免疫elisa試劑盒規(guī)格D- 氨基酸氧化酶 5 mg
山羊抗小鼠 IgG(H+L),異硫氰酸熒光素標記 00 μL
CAS606-2-4 琥珀酸,六水 25g
824-0 Tricine-SDS-PAGE 陽極電泳液 ( 干粉 ) 0L
總過氧化物酶檢測試劑盒 00 次
綠如蘭核酸染料 ( 可見光型 ) 0mL
支鏈淀粉 g
蛋白去除試劑 M 5 g