產(chǎn)品展示
A549 人肺癌細(xì)胞
本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗,不做其他科學(xué)實驗外的使用!
種屬 | 人 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
生長特性 | 貼壁 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 編號 | GOY-01X1681 |
商品詳情:
生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)方案A(默認(rèn))
生長培養(yǎng)基:
Ham's F-12K+10% FBS+1% P/S
培養(yǎng)條件:
氣相:空氣,95%;CO2,5%, 溫度:37℃
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2-3次/周
參考資料(來源文獻(xiàn))
背景描述 A549細(xì)胞是由D·J·Griad通過肺癌組織移植培養(yǎng)建系,源自于一位58歲白人男性;A549能通過胞苷二磷酸途徑合成含有高含量不飽和脂肪酸的卵磷
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min(視細(xì)胞消化情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠纖維連接蛋白(FN)檢測試劑盒 ,英文名: FN ELISA Kit
Mouse collagenase type II (Collagenase II) ELISA Kit 小鼠膠原酶II(Collagenase II)檢測試劑盒
Mouse6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISAKit 小鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanPeptideYYELISAKit人多肽YY
同位素[α32P]dCTP聚合酶標(biāo)記微衛(wèi)星擴增試劑盒20次
ELISAKitxR大鼠硫氧還蛋白還原酶
DARS重組人 DARS 蛋白 Protein
STAT3(signal transducers and activators of transduction3 0.5mgSTAT3(signal transducers and activators of transduction3) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗原
YWHAE重組人 14-3-3 epsilon / YWHAE 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
FZD10 Protein Human 重組人 Frizzled-10 / FZD10 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
SLITRK1 Protein Human 重組人 SLITRK1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
STAT3(signal transducers and activators of transduction3 0.5mgSTAT3(signal transducers and activators of transduction3) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗原
FZD10 Protein Human 重組人 Frizzled-10 / FZD10 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
DARS重組人 DARS 蛋白 Protein
SLITRK1 Protein Human 重組人 SLITRK1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
YWHAE重組人 14-3-3 epsilon / YWHAE 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
A549 人肺癌細(xì)胞小鼠補體蛋白4(C4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human glycogen phosphorylase II (GP-II) ELISA Kit 人糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)檢測試劑盒
HumanCreatineKinaseMBisoenzyme,CK-MBELISAKit 人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanBonemorphogeneticprotein7,BMP-7檢測試劑盒人骨成型蛋白7(BMP-7)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物總吲哚-3-乙酸(IAA)比色法定量檢測試劑盒(包括萃取)20次
Humansteroidproducingcellaoaibody,SCAELISAKit人抗類固醇生成細(xì)胞抗體(SCA)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔血清總補體(CH50)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔乙酰受體抗體(AChRab)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISAKit ELISA. 96T/48T
細(xì)胞培養(yǎng)注意事項 :
一、 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
二、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
三、用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
四、貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
五、 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
六、 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
七、該細(xì)胞僅供科研使用。
八、備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。
九、 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。