細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。

UACC-3199人乳腺癌細(xì)胞

商品屬性

商品介紹

種屬來源：人

性別年齡：58 歲，白人女性

生長特性：貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞規(guī)格：1 X 106cells/T25 或 1 mL 凍存管

培養(yǎng)條件：Leibovitz's L-15 Medium+10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

凍存條件：90% FBS + 10% DMSO

傳代方法：1:3 傳代, 2-3 天傳 1 代

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

（9）細(xì)胞凍存

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

熱休克蛋白β2(HSPβ2)重組蛋白 Recombinant Heat Shock Protein Beta 2 (HSPb2)

FLRT3 Protein Human 重組人 FLRT3 蛋白

EPHB4重組人 EphB4 / HTK 蛋白 Protein

NA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (N294S mutation) (高活性)

PKLR重組人 PKLR / PKRL 蛋白 Protein

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小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA 試劑盒 96T/48T

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HumanhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 人超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanB-CellLinkerProtein,BLNK檢測試劑盒人B細(xì)胞連接蛋白(BLNK)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物種子高質(zhì)化葉綠體分離試劑盒10次

Huma-cellspecificGTPase,TgtpELISAKit人T細(xì)胞特異性鳥苷三0酸酶(Tgtp)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

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豚鼠端粒酶(TE)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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ELISA 小鼠白介素-2(mouse IL-2)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-7(MouseIerleukin-7)ELISAkit小鼠白介素7

通用型肌酐(CREATININE)化學(xué)比色法定量檢測試劑盒50次

ELISAKitAmylin大鼠胰淀素