產(chǎn)品展示
RWPE-1人前列腺正常細胞
本公司所有產(chǎn)品僅供科學實驗,不做其他科學實驗外的使用!
種屬 | 人 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
生長特性 | 貼壁生長 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 編號 | GOY-01X1745 |
商品詳情:
細胞別稱:RWPE-1;人正常前列腺上皮細胞
種屬來源:人
年齡性別:男;54歲
組織來源:前列腺正常細胞
生長特性:貼壁生長
細胞形態(tài):上皮細胞樣
參考資料(來源文獻)
RWPE-1細胞來源于54歲白人男性。源于正常成人前列腺周邊組織的上皮細胞經(jīng)過轉(zhuǎn)染HPV-18后建系得到該細胞株。在三維基質(zhì)膠培養(yǎng)時,在雄激素作用下,RWPE-1細胞形成腺胞并向培養(yǎng)基:中分泌PSA(kallikrein 3, KLK3)。來源于RWPE-1的細胞再用Kirstin鼠類腫瘤病毒轉(zhuǎn)染Ki-ras基因,建立了能成瘤的RWPE-2細胞株和 RWPE2-W99細胞株。同時,用N-甲醇-N-處理RWPE-1,建立了一系列模擬前列腺癌進程中不同時期的成瘤細胞株, 分別是 WPE1-NA22, |
細胞培養(yǎng)操作:
1) 復(fù)蘇細胞:以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤? cm皿中,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第三天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min(視細胞消化情況而定),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細胞培養(yǎng)注意事項 :
一、 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
二、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,責任由 客戶自行承擔。
三、用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
四、貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
五、 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
六、 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
七、該細胞僅供科研使用。
八、備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。
九、 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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DAPK3 Protein Human 重組人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 標簽)
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CST3 Protein Rat 重組大鼠 Cystatin C / CST3 蛋白
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Mousealkalinephosphatase,ALPELISAKit小鼠堿性0酸酶(ALP)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
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小鼠甲狀腺素(T4)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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