當(dāng)前位置：哪些原因會導(dǎo)致Elisa試劑盒實驗的失敗？
點擊次數(shù)：489 更新時間：2021-07-20
Elisa試劑盒應(yīng)用的范圍很廣，而且正在不斷地擴大，原則上Elisa試劑盒可用于檢測一切抗原、抗體及半抗原，可以直接定量測定體液中的可溶性抗原。
導(dǎo)致Elisa試劑盒實驗失敗的原因：
一、標(biāo)本的影響
溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清采用ELISA法檢測易產(chǎn)生假陽性?？赡苁侨苎逯泻羞^氧化酶物質(zhì)(紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素)，在洗滌過程中往往難以*洗脫，它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧(O)，從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì)，即顯藍(lán)色，產(chǎn)生假陽性。所以嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。
二、標(biāo)本受細(xì)菌污染
因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶，因此，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本樣，亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果。
三、標(biāo)本保存不當(dāng)
在冰箱中保存過久的標(biāo)本，在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深、造成假陽性；為克服上述干擾，ELISA試劑盒測定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集；如不能立即測定，5d內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于4℃，周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存；凍存后融解的標(biāo)本，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混合后再測定，但混勻時應(yīng)輕柔，不可強烈振蕩。
四、標(biāo)本凝固不全
在工作中，有時為了爭取時間快速檢測，常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清，使血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊，易造成假陽性結(jié)果；因此血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。
