檢測(cè)試劑盒?操作步驟:
、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20-25℃)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2、取出需要數(shù)量的微孔板,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
3、洗滌工作液在使用前也需回溫。
4、編號(hào):將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本:加入標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50ml 到對(duì)應(yīng)的微孔中,然后加入抗體工作液50ml/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)30min。
6、洗板:小心揭開(kāi)蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌工作液(見(jiàn)配液8)250ml/孔,充分洗滌4-5次,每次間隔0s,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳破)。
7、加酶標(biāo)二抗:加入酶標(biāo)二抗00ml/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)30min,取出重復(fù)洗板步驟6。
8、顯色:加入底物液A液50ml/孔,再加底物液B液50ml/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)5min(見(jiàn)注意事項(xiàng)8)。
9、測(cè)定:加入終止液50ml/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處(建議用雙波長(zhǎng)450/630nm檢測(cè),請(qǐng)?jiān)?min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測(cè)定每孔OD值。(若無(wú)酶標(biāo)儀,則不加終止液用目測(cè)法可進(jìn)行判定)。
結(jié) 果 判 定
白色藥片變?yōu)樗{(lán)綠色或與空白對(duì)照卡相同,為陰性結(jié)果;白色藥片不變色或略有淺藍(lán)色均為陽(yáng)性結(jié)果,不變藍(lán)為強(qiáng)陽(yáng)性結(jié)果,說(shuō)明農(nóng)yao殘留量較高,顯淺藍(lán)色為弱陽(yáng)性結(jié)果,說(shuō)明農(nóng)yao殘留量相對(duì)較低。
對(duì)陽(yáng)性結(jié)果的樣品,可用其它分析方法進(jìn)一步確定具體農(nóng)yao品種和含量。