當前位置：哪些因素會導(dǎo)致Elisa試劑盒實驗不成功？
點擊次數(shù)：516 更新時間：2020-07-21
導(dǎo)致其Elisa試劑盒實驗不成功的原因：
.標本的影響
溶血標本及混有紅細胞的血清采用ELISA法檢測易產(chǎn)生假陽性.可能是溶血血清中含有過氧化酶物質(zhì)(紅細胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素),在洗滌過程中往往難以*洗脫,它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧(O),從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì),即顯藍色,產(chǎn)生假陽性.所以嚴重溶血標本禁用.
2.標本受細菌污染
因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,被細菌污染的標本同溶血標本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果.
3.標本保存不當
在冰箱中保存過久的標本,在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深 造成假陽性；為克服上述干擾,ELISA試劑盒測定的血清標本宜為新鮮采集；如不能立即測定,5d內(nèi)測定的血清標本可存放于4℃,周后測定的血清標本應(yīng)低溫凍存；凍存后融解的標本,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混合后再測定,但混勻時應(yīng)輕柔,不可強烈振蕩.
4.標本凝固不全
在工作中,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果；因此血液標本采集后必須使其充分凝固后再分離血清.
