羊N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶試劑盒實驗結果計算
點擊次數(shù):866 更新時間:2020-05-07
羊N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)操作步驟
. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體00μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育5min。
7. 每孔加入終止液50μL,5min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
實驗結果計算
以所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。
試劑盒性能
. 檢測范圍:5 mU/mL – 60 mU/mL。
2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于.0 mU/mL。
3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4. 重復性:板內(nèi)變異系數(shù)小于0% ,板間變異系數(shù)小于5% 。