雞附紅細(xì)胞體(雞嗜血支原體)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品(以 0E2-0E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 0 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供無(wú)傳染性的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL ×0E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(試劑盒提供),充分震蕩分鐘,得 ×0E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL ×0E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 分鐘,得 ×0E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL ×0E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩分鐘,得 ×0E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。