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大鼠ELISA試劑盒和陰影結(jié)果的稀釋度
點擊次數(shù):1154 更新時間:2018-09-13

       大鼠ELISA試劑盒每次試驗均應(yīng)同時使用陰性對照血清,可選擇強陽性的血清作為標(biāo)準(zhǔn)對照血清,并可自己設(shè)定其為00單位(免疫酶單位-EIU)。這樣每次試驗均參考陽性血清結(jié)果確定每份血清的相對抗體水平,其計算公式如下:標(biāo)本值-陰性對照值  陽性對照值-陰性對照值有此測定(如間接法ELISA試劑盒)需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液,再在其中加入血清標(biāo)本,然后在微型震蕩器上震蕩分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時可用定量多道加液器,在ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。

       如果國內(nèi)或上的標(biāo)準(zhǔn)抗體和檢測方法,那么所用的參考血清應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)血清對照實驗進行標(biāo)準(zhǔn)化,但如果所用的檢測方法不同,標(biāo)準(zhǔn)化時就存在差別,不同的方法ELISA試劑盒檢測出的結(jié)果不能反映出參考血清和標(biāo)準(zhǔn)血清之間的差別。無特異抗體的血清稀釋陽性血清繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,選擇的稀釋度應(yīng)很容易區(qū)別陽性。

      抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育(incubation),有人稱之為孵育,在ELISA試劑盒中似不恰當(dāng)。

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