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小鼠ELISA試劑盒反應(yīng)的結(jié)果判斷方法
點(diǎn)擊次數(shù):1048 更新時(shí)間:2018-08-14

    小鼠ELISA試劑盒定性測(cè)定的結(jié)果判斷是對(duì)受檢標(biāo)本中是否含有待測(cè)抗原或抗體作出"有"或"無(wú)"的簡(jiǎn)單回答,分別用"陽(yáng)性"、"陰性"表示。"陽(yáng)性"表示該標(biāo)本在該測(cè)定系統(tǒng)中有反應(yīng)。"陰性"則為無(wú)反應(yīng)。用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果,即用滴度來(lái)表示反應(yīng)的強(qiáng)度,其實(shí)質(zhì)仍是一個(gè)定性試驗(yàn)。在這種半定量測(cè)定中,將標(biāo)本作一系列稀釋后進(jìn)行試驗(yàn),呈陽(yáng)性反應(yīng)的zui高稀釋度即為滴度。根據(jù)滴度的高低,可以判斷標(biāo)本反應(yīng)性的強(qiáng)弱,這比觀察不稀釋標(biāo)本呈色的深淺判斷為強(qiáng)陽(yáng)性、弱陽(yáng)性更具定量意義。 在間接法和夾心法ELSIA中,陽(yáng)性孔呈色深于陰性孔。在競(jìng)爭(zhēng)法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽(yáng)性孔。兩類(lèi)反應(yīng)的結(jié)果判斷方法不同,分述于下。
() 間接法和夾心法 
    這類(lèi)反應(yīng)的定性結(jié)果可以用肉眼判斷。目視標(biāo)本也無(wú)色或近于無(wú)色者判為陰性,顯色清晰者為陽(yáng)性。但在ELSIA中,正常人血清反應(yīng)后??沙霈F(xiàn)呈色的本底,此本底的深淺因試劑的組成和實(shí)驗(yàn)的條件不同而異,因此實(shí)驗(yàn)中必須加測(cè)陰性對(duì)照。陰性對(duì)照的組成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類(lèi)似物(見(jiàn)3.6)。在用肉眼判斷結(jié)果時(shí),更宜用顯色深于陰性對(duì)照作為標(biāo)本陽(yáng)性的指標(biāo)。目視法簡(jiǎn)捷明了,但頗具主觀性。在條件許可下,應(yīng)該用比色計(jì)測(cè)定吸光值,這樣可以得到客觀的數(shù)據(jù)。先讀出標(biāo)本(sample,S)、陽(yáng)性對(duì)照(P)、和陰性對(duì)照(N)的吸光值,然后進(jìn)行計(jì)算。計(jì)算方法有多種,大致可分為陽(yáng)性判定值法和標(biāo)本與陰性對(duì)照比值法兩類(lèi)。
a. 陽(yáng)性判定值 
    陽(yáng)性判定值(cut-off value)一般為陰性對(duì)照A值加上一個(gè)特定的常數(shù),以此作為判斷結(jié)果陽(yáng)性或陰性的標(biāo)準(zhǔn)。用此法判斷結(jié)果要求實(shí)驗(yàn)條件十分恒定,小鼠ELISA試劑盒試劑的制備必須標(biāo)準(zhǔn)化,陽(yáng)性和陰性的對(duì)照品應(yīng)符合一定的規(guī)格,須配用精密的儀器,并嚴(yán)格按規(guī)定操作。陽(yáng)性判定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中通過(guò)對(duì)大量標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)而得到的。

 C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族5成員A抗體 TNFRSF4/HVEM

 C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族6成員A抗體 TNFRSF3B

 C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族7成員A TNFRSF2A/TWEAKR

 C-藻藍(lán)素/藻藍(lán)蛋白抗體 TNF-beta

 DAP凋亡誘導(dǎo)蛋白激酶2抗體 TNF-alpha

 DDX4抗體 TNF-alpha

 DDX58抗體 TNF-alpha

 DEK癌基因結(jié)合蛋白 TNFAIP3

 DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體 TNFAIP

 DISC C端抗體 TMEM66

 DISC N端抗體 TMEFF2
小鼠ELISA試劑盒

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