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技術(shù)文章

收到?人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H460 [H460]應(yīng)該注意什么?
點(diǎn)擊次數(shù):516 更新時(shí)間:2024-09-05

      客戶收到細(xì)胞先不開(kāi)蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開(kāi)封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。


     收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過(guò)80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過(guò)80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。在完成了初步的細(xì)胞觀察和評(píng)估后,客戶還需注意細(xì)胞的日常維護(hù)。對(duì)于貼壁細(xì)胞NCI-H460,應(yīng)定期檢查培養(yǎng)基的顏色和透明度,確保營(yíng)養(yǎng)充足且沒(méi)有污染跡象。如果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基變黃或渾濁,應(yīng)及時(shí)更換新鮮培養(yǎng)基,并再次檢查細(xì)胞狀態(tài)。同時(shí),維持培養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)定至關(guān)重要,包括溫度(通常為37°C)、濕度(95%以上)以及CO?濃度(通常為5%),這些參數(shù)直接影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和分裂。


     此外,為了保持細(xì)胞的健康狀態(tài)和遺傳穩(wěn)定性,建議客戶遵循細(xì)胞的傳代周期進(jìn)行操作,避免過(guò)度傳代導(dǎo)致細(xì)胞老化或特性改變。每次傳代時(shí),記錄好細(xì)胞的傳代次數(shù)、培養(yǎng)條件以及任何觀察到的異?,F(xiàn)象,這對(duì)于后續(xù)的實(shí)驗(yàn)分析和數(shù)據(jù)解讀至關(guān)重要。


     對(duì)于懸浮細(xì)胞,除了上述的離心和重懸操作外,還需注意細(xì)胞的均勻分布,避免細(xì)胞團(tuán)塊形成,影響細(xì)胞生長(zhǎng)和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。在細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí),使用合適的計(jì)數(shù)板和方法,確保細(xì)胞密度的準(zhǔn)確測(cè)量。


     最后,客戶在使用NCI-H460細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前,應(yīng)充分了解該細(xì)胞系的背景信息、生物學(xué)特性及實(shí)驗(yàn)應(yīng)用,以便更好地設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案,提高實(shí)驗(yàn)的成功率和可靠性。同時(shí),遵守實(shí)驗(yàn)室的安全操作規(guī)程,確保個(gè)人安全和實(shí)驗(yàn)環(huán)境的整潔有序。


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